聊到PCR實(shí)驗(yàn)室裝修注意要點(diǎn),我們首先得明白PCR是什么,又包括那些步驟?
PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是指在DNA聚合酶催化下,以母鏈DNA為模板,以特定引物為延伸起點(diǎn),通過變性、退火、延伸等步驟,體外復(fù)制出與母鏈模板DNA互補(bǔ)的子鏈DNA的過程。是一項(xiàng)DNA體外合成放大技術(shù),能快速特異地在體外擴(kuò)增任何目的DNA??捎糜诨蚍蛛x克隆,序列分析,基因表達(dá)調(diào)控,基因多態(tài)性研究等許多方面。
PCR變性,指的是在高溫下將模板DNA打開的過程;退火,則指引物在比較低的溫度下以共價(jià)鍵結(jié)合到模板DNA互補(bǔ)部位;延伸,指TapDNA聚合酶作用下,不斷向引物端添加DNTP,DNA鏈不斷延伸,放大 的過程。
其中變性的溫度一般在95℃左右,退火溫度控制在55℃左右,延伸則一般控制在72℃左右。
基于以上三個(gè)基本步驟,因此我們在設(shè)計(jì)PCR實(shí)驗(yàn)室的時(shí)候,為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。